فرمت فایل: پاورپوینت - ppt  

کتاب سبز - قابل ویرایش ) 

تعداد اسلاید : 40
كلن كردن ژن مراحل كلن كردن ژن استخراج ژن مورد نظر انتقال ژن مورد نظر به ناقل مناسب انتقال ناقل نوتركيب به درون سلول ميزبان گزينش سلول هاي تراريخت شده تكثير سلول هاي تراريخت شده اهداف كلونينگ توليد انبوه يك پروتئين مثال:انسولين انساني هرمون رشد انساني اينترفرون واكسن هپاتيت B اينترلوكين اريتروپوئيتين 2. دستكاري مسير هاي بيولوژيك جهت اصلاح محصولات گياهي وحيواني مثال:توليد گوجه فرنگي كه ديتر نرم ورسيده ميشود ابزار مورد نياز براي كلونينگ انزيم هاي برشي وانزيم هاي اتصال دهنده ناقلين كلونينگ انزيم هاي برشي اين انزيمها اندونوكلئاز ميباشند واز باكتري استخراج ميشوند اين انزيم ها در باكتري نقش دفاعي دارند نحوه نام گذاري اين انزيم ها حرف اول: جنس حرف دوم وسوم: گونه حرف چهارم : نژاد عدد: ترتيب كشف انزيم از منبع مثال :ECOR1 مثال :HIND3 مثال :BamH1 خصوصيات انزيم هاي برشي كوفاكتور:Mg 2+ توالي هاي پاليندرومي را شناسايي وبرش ميدهند نحوه برش به دو صورت است:1)ايجاد انتهاي چسبان 2)ايجاد انتهاي صاف انزيم هاي اتصال دهنده اين انزيم ها براي اتصال ژن خارجي به ناقل استفاده ميشوند دو نوع انزيم انتصالي داريم: Ecoli.DNA ligase T4 DNA ligase ناقلين كلونينگ ناقلين كلونيگ بايد داراي ويزگي هاي زير باشند: Ori داشته باشند داراي ژن نشانگر باشند داراي مكان برشي باشند انواع ناقلين كلونينگ پلاسميد ها: PBR322 Puc pTi باكتريوفاژ: M13 لامبدا كاسميد شاتل كروموزو مصنوعي مخمر انواع پلاسميد بر حسب عملكرد: انواع پلاسميدهاي كلونينگ توضيح نحوه گزينش سلول هاي تراريخت شده سلول هاي دسته اول به امپي سيلين حساس ميباشند و دسته دوم وسوم مقاوم به امپي سيلين مي باشند بنابر اين با اضافه كردن امپي سيلين سلول هاي دسته اول را حذف ميكنيم سپس 2 محيط كشت تهيه ميكنيم كه يكي محتوي امپي سيلين وديگري محتوي تترا سايكلين در محيط كشت امپي سيلين هر2 گروه سلول رشد ميكنند و در محيط كشت تترا سايكلين سلول هاي حاوي پلاسميد غير نوتركيب رشد ميكند بامقايسه باكتريها در اين دو محيط كشت باكتري هاي تراريخت راشناسايي ميكنيم PUC پلاسميد كاليفرنيايي توضيح نحوه گزينش سلول هاي تراريخت به محيط كشت انتي بيوتيك امپي سيلين اضافه ميكنيم در نتيجه سلول هاي رده اول حذف ميشوند سپس ماده xgal را اضافه ميكنيم سلول هايي كه به رنگ ابي در مي ايند حاوي پلاسميد غير نوتركيب ميباشند وسلول هايي كه به رنگ سفيد در مي ايند حاوي پلاسميد نوتركيب ميباشند پلاسميد Ti اجزاي پلاسميد Ti اجزاي T-DNA مكانيسم انتقال T-DNA به گياه 6. virD1 وvirD2 به عنوان اندو نوكلئاز T-DNA را در نواحي مرز راست وچپ برش ميدهد 7.VirB1 منفذي در سلول گياهي ايجاد ميكند 8.VirE2 وvirc2 مانند يك هليكوپتر T-DNA رااز خلال منفذ به سلول گياهي منتقل ميكند پلاسميدTi خلع سلاح شده حد اكثر طول قطعه كلونينگ در پلاسميدها: Kb10 ميباشد ناقل باكتريوفازي ناقل لامبدا با استفاده از انزيم BamH1 ناحيه B را جدا ميكنيم و ژن مورد نظر را وارد ميكنيم حداكثر طول قطعه كلونينگ در فاژ لامبدا:Kb25 نحوه گزينش سلول هاي تراريخت بر اساس غير فعال شدن ژن CI فاژM13 كاسميد شاتل كروموزوم مصنوعي مخمر روش هاي انتقال ناقل نوتركيب به داخل سلول ميزبان روشهاي شناسايي سلول هاي ترارخت

قسمتی از متن بالا پروژه میباشد که به صورت نمونه ، بعد از پرداخت آنلاین در جزوه باز آنی فایل را دانلود نمایید .

  

 « پرداخت آنلاین و دانلود در قسمت پایین »